Immunanalytik

Der Fachbereich im Überblick

Im Fachbereich Immunanalytik dreht sich alles um Antikörper und deren analytische Anwendung. Diese Y-förmigen Proteine bringen eine hohe Selektivität in unsere Methoden, die sich über alle antikörperbasierten Verfahren erstrecken.

Neben der Anwendung von Antikörpern arbeiten wir auch an Verbesserungen bei der Erzeugung monoklonaler Antikörper.

Ein weiterer Arbeitsschwerpunkt ist die Entwicklung von Validierungskonzepten und die Bearbeitung von Fragen zur Qualitätssicherung bei Immunoassays, z. B. zur Kalibrierung und zur Ermittlung der Nachweisgrenze. Wir führen zu den Assays Vergleichsuntersuchungen mit instrumentellen Referenzverfahren durch, die wir selbst erarbeiten. Die entwickelten und validierten Immunreagenzien, Antikörper und Konjugate werden über den Webshop zum Verkauf angeboten.

Die Mitarbeiter des Fachbereiches sehen sich als Ansprechpartner für Forscher, Entwickler und Anwender im Sinne eines Kompetenzzentrums Immunoassay.

Arbeitsschwerpunkte

Pipettierautomat zum Pipettieren in Mikrotiterplatten

• Erzeugung monoklonaler Antikörper (in Firmenkooperationen)
• Haptendesign, -synthese und -charakterisierung durch Kernspinresonanzspektroskopie (NMR) und Röntgenstrukturanalyse (in Kooperation mit Fachbereich 1.3 Strukturanalytik)
• Konjugatsynthese (Trägerproteine, Enzyme) und Konjugatcharakterisierung mit Elektrospray-Ionisations-Massenspektrometrie (ESI-MS), Matrix-unterstützter Flugzeitmassenspektrometrie (MALDI-TOF-MS) und (Kapillar-) Elektrophorese (CE)
• Aufbau und Optimierung von Immunoassays diverser Formate: Enzymimmunoassay (ELISA), Fluoreszenzimmunoassay (FIA), Fluoreszenzpolarisationsimmunoassay (FPIA), Chemilumineszenzimmunoassay (CLEIA)
• Entwicklung von Validierungskonzepten für Immunoassays z. B. in-house-Validierung, Unsicherheitsbudgets, optimale Kalibrierung, Nachweisgrenzen
• Entwicklung von Phasen für die Immunaffinitätsextraktion
• Referenzanalytik LC-MS/MS - Flüssigchromatographie gekoppelt mit Tandem-Massenspektrometrie ggf. nach Festphasenextraktion (SPE)
• Bereitstellung von standardisierten Immunmaterialien
• Arbeiten im Tätigkeitsbereich Prüfung, Analyse, Zulassung (PAZ): Bearbeitung von Analysenaufträgen sowie Verkauf von Immunreagenzien (Antikörper und Tracer/Konjugate)
• Arbeiten im Tätigkeitsbereich Beratung und Information (BI): Mitarbeit in der Bioanalysis Working Group des CCQM; Teilnahme an Ringversuchen

Geräte und Methoden

Photometer zum Auslesen von Mikrotiterplatten

• Mikrotiterplatten-Spektrophotometer (SpectraMax Plus384, Molecular Devices)
• Multidetektions-Mikrotiterplatten-Lesegerät (SpectraMax M5, Molecular Devices) - genutzt mit Fachbereich 1.10)
• Mikrotiterplatten-96-Kanal-Waschgerät (ELx405™, BioTek)
• Mikrotiterplatten-96-Kanal-Pipettiergerät (Liquidator96)
• Mikrotiterplatten-Pipettier-Arbeitsstation epMotion (Eppendorf)
• LC-MS/MS Arbeitsstation mit TSQ (Triple Stage Quadrupole) für ESI/APCI-Ionisation (API 4000, AB Sciex)
• HPLC-UV/vis/FLU Arbeitsstation (System 1200, Agilent)
• Orbitrap “Exactive” Mass Spektrometer mit Kapillar-LC (Thermo Scientific) - genutzt mit Fachbereichen 1.5, 1.9, 1.10
• MALDI-TOF/TOF-MS (Bruker Autoflex III) - genutzt mit 1.0
• MALDI-TOF-MS (Bruker Reflex III) - genutzt mit 1.0
• Festphasenextraktion-Arbeitsstation AutoTrace (Caliper)
• Kapillarelektrophorese (CE)-Arbeitsstation (Agilent)
• Laminar-Flow-Werkbänke, Brutschränke zur Zellanzucht
• sam5 (Surface Acoustic Wave Sensor; SAW Instruments) - genutzt mit Fachbereich 1.5
• Isotherme Titrations-Kalorimetrie VP-ITC (MicroCal) - genutzt mit Fachbereich 1.5
• ASE Accelerated Solvent Extraction (Dionex)
• Durchflusszytometer CyFlow space (Partec) mit Partikel- und Zellsortiereinheit, zwei Laserquellen (488 nm und 630 nm), zwei Streu- und drei Fluoreszenzparametern - genutzt mit Fachbereich 1.9
• MiniArrayer BioOdyssey Calligrapher mit Keramikpins (BioRad) - genutzt mit Fachbereich 1.9

Anwendungsgebiete und Analyte

Antikörperverdünnungen in Mikroreaktionsgefäßen

Wichtige Anwendungsgebiete unserer Methoden sind:

• Umweltanalytik (insbesondere Abwasser-, Oberflächengewässer, Grund- und Trinkwasser)
• Klinische Diagnostik (insbesondere Point-of-Care Testing)

Bearbeitete Analyte sind:

• Östradiol (E2), Ethinylöstradiol (EE2), Östron (E1) und Metaboliten
• Carbamazepin und Metaboliten
• Cetirizin
• Koffein und andere Xanthine sowie deren Metaboliten
• Coprostanol, Isolithocholsäure und weitere Sterole
• Sulfamethoxazol und andere Sulfonamide, sowie Abbauprodukte/Metaboliten
• Laccase aus Trametes versicolor
• Kardiales Troponin I (cTnI)
• C-reaktives Protein (CRP)
• Fettsäurebindendes Protein (FABP)

Kooperationen

Vielbenutzt in der Bioanalytik: eine 8-Kanal-Pipette

Universitäten

• D. S. Aga; Department of Chemistry – Analytical Chemistry, University at Buffalo, The State University of New York, Buffalo, NY, USA
• V. I. Esteves, D. L. D. Lima, V. Calisto; Department of Chemistry & Center for Environmental and Marine Studies (CESAM), Universidade de Aveiro, Aveiro, Portugal
• J. Tomé; Department of Chemistry; Universidade de Aveiro, Aveiro, Portugal
• L.-A. Garbe, Fachgebiet Bioanalytik, Technische Universtität Berlin
• B. Ondruschka, P. Bräutigam, Institut für Technische Chemie und Umweltchemie; Friedrich-Schiller-Universität Jena
• J. Raba, G. A. Messina, INQUISAL, Departamento de Química, Universidad Nacional de San Luis, San Luis, Argentina
• S. A. Eremin, Department of Chemistry, Division of Chemical Enzymology, Immunoassay Group, M.V. Lomonosov Moscow State University, Moscow, Russia
• M. Jekel, Institut für Technischen Umweltschutz, Fachgebiet Wasserreinhaltung; Technische Universität Berlin

Unternehmen

• J. A. Schenk, Hybrotec GmbH, Potsdam-Golm
• I. Renneberg, M. Lehmann, 8sens.biognostic GmbH, Berlin-Buch
• A. Mattulat, PiCA Prüfinstitut Chemische Analytik; Berlin-Adlershof
• U. Dahmen-Levison, F. Mallwitz; aokin GmbH, Berlin-Buch
• U. Dünnbier, Berliner Wasserbetriebe (BWB)
• G. Peine, zmdb – Zentrum für Molekulare Diagnostik und Bioanalytik, Berlin

Mitgliedschaften

• DiagnostikNet BB – Netzwerk Diagnostik Berlin-Brandenburg e.V.

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